土曜日は午前中、子供を体操教室に連れていった後は特別何かあるわけでなかったので、

家で子供の相手かな？と思っていたら、奥さんの会社の同期が家に来ることになり、大掃除・・。

更に実家に父親が帰って来ている（単身赴任中の為）ので、実家に行くことになり、

忙しくなってしまいました。

奥さんの同期のお子ちゃまも一緒でした。

産まれた直後に会った以来でしたので、随分大きくなってました（もう10ヶ月）。

実家では、おいしいお鍋を食べました。

年明けからちょいと食べ過ぎで体重コントロールがうまくいってないので、

控えないといけないのだが・・今日もお腹一杯です。

子供が早々に寝たので、奥さんと一緒に近くにオープンした温泉に行きました。

少し高めの値段設定ですが、それを満足させる施設、雰囲気でした。

夜1:00にも関わらず、人が一杯でした。

翌日の日曜日は、子供の保育園で体操教室と焼き芋大会に参加。

保育園に体操の先生が来られて、子供と一緒に運動しました。

ほんと、子供は元気です。テンションが並ではありません（当たり前か・・）。

今週末は、ラボの方は休みました。

ちょうど金曜日にやれることはやったので、結果待ちです。

今日は今からラボに向かいます。

ライゲーションうまくいったかな？

お願いしておきました。

会社でも月曜日から開始する実験の準備でバタバタしてました。月曜日から3日連続で実験です。

今、一番優先順位が高い実験が進んでいるようでいい感じです。

ある遺伝子を別のプラスミド（過剰発現するプラスミド）に移しかえた後、ある細胞の表現型を

回復することができるかを確認する作業です。

遺伝子をプラスミドにライゲーション後、大腸菌に形質転換し、青白の結果だとほぼ白コロニーしかなく、

コントロールでいれたベクターのみの形質転換では、

コロニーが数個しかなかったので、ベクターの制限酵素消化、BAP処理が相当うまくいったのだと思います。

ミニプレップ後の2次確認で、BglIIの切れが悪く構造確認が出来なかったので、今日はo/nで消化して

明日最終確認です。明日は行けそうにないのでM2の学生さんにお願いしています。

あと今日はストリークをしました。別の表現型を相補するコスミドが、我々が手掛けている細胞の

表現型を相補するらしく・・、再現性を確認するためにやりました。

相補するコスミドの制限酵素消化（BamHI, HindIII）の結果から、ライブラリを作製し易い感じだったので

来週ぐらいから開始しようかなと考えています。

ストリークが終わって、ラボの居室に帰ったら、もう学生さん一人になっていて、帰る準備をしてました。

「今日はみんな帰りが早いな～」と思ったら,今日でM2の人は修論の要旨の提出が完了したようです。

だからかも知れません。M1の人は良くわかりませんが・・・。

明日は朝、子供を体操教室に送り、午後からも相手をすることになりそうです。

昨日ようやくセミナーが終了したので、少し落ち着きました。

これまでのセミナーでは、実験の方法や条件等の指摘が多く、

その後の追試実験等をしなければいけないということが多かったのですが、

今回はそのような指摘は少なく、前向きな良いアドバイスを多く頂くことができました。

僕の後に引き続き、一緒に実験しているM2の学生さんの発表もあったのですが、

そちらも前向きなアドバイスが多く、ほんと、実りあるセミナーでした。

最近、先生のご機嫌が良いとのことなので、その為かも知れません。

いずれにしよ、このようなセミナーの後は、すこぶる実験に対する意欲が高ぶります。

明日から早速、頑張ろうと思います。

取り急ぎ、あるDNAを過剰発現plasmidへの移し変え後、細胞の表現型を回復するかを

確認することが重要になりそうです。

回復できれば、約10ヶ月くらいかけて実施してきたスクリーニングを終了することができます。

M2の学生さんが進めている実験も良いデータが出てきているので、今後の展開が楽しみです。

こちらについてもある細胞の表現型を回復するplasmidがゲノムライブラリーから数種類

取れてきているので、同定する遺伝子によってはまた別の切り口で話を進めることが

出来るかもしれません。またこれまで取れてきている遺伝子とのinteraction等も

ある可能性が高いので、非常に楽しみです。

Weekday中、1日は子供のお世話をする約束になっています。

睡眠時間が不足しているので、昨日は子供と一緒にパッタリと寝てしまいました・・。

昼間は、会社で検討実験が立て込んでいるので、忙しかったです。

今やっている検討実験の中では、過冷却装置を用いた検討が可能性が色々あって面白そうです。

過冷却現象とは、物質にはある温度帯で凍り（凝固）し始める性質があり、

その凍り始める温度を氷結点（凝固点、水だと0℃）というのですが、

その氷結点を越えて（水の場合は0℃以下）でも物質が凝固しない（不凍）状態をいいます。

更にその状態で電磁場をかけることにより、細胞等のナマモノが微妙に活性化され、

氷結点以下の不凍状態で長期保存が可能になるそうです。

この技術を用いれば、通常細胞や臓器など、長期保存が難しいようなものでも

functionを維持した状態で保存ができるということで、

動物実験で得た検体や臓器移植などでの応用が期待されています。

我々のグループでもこの装置を購入（意図して購入したわけではないのですが・・）

したのでその利用方法についての可能性を検討しています。

まだ始まったばかりですが、楽しみです。

最近会社では余り実験的なことはしてなかったので何か良いデータが得られるように

頑張るのみです。。

今日は仕事も忙しかったので、その後の実験はさずがに疲れました。

しかも今日はある株の感受性を確認するためのスポットをプレート20枚近くしなければ

いけなかったので、気がついたら終電でした。

細胞の希釈をしてもらっていただけマシでした・・。

かなりn数を重ねたので、コンタミせず、きれいな結果が出ることを期待しています。

また別の実験で構築とライブラリの作製のためのライゲーションを昨日o/nでしていたので、

それを大腸菌に形質転換、LBにスプレッドしました。

明日、S君にプレートをチェックしてもらい、その後の実験を進めていってもらう予定です。

今週頭にライゲーションした別の構築のミニプレの結果、予測外のバンドが確認されたので

原因追求のための実験もお願いしました。

ゲル抽出してるのに、なんでだろう？

酵素がコンタミ？ミニプレが原因？いずれにしてもやり直しです。

なかなか簡単に前に進まないなーって感じでした。

テニスは学生時代に体育会に所属しており、4年間びっちり鍛えられました。

この4年間の経験が僕の人生の中では大きなウエイトを今でも占めています。

それほど大きな経験でした。

それは置いといて、昨日は今年度の初打ちでした。

いつもはオムニコート（人工芝）でやるんだけど、昨日は室内（といっても体育館なのでツルツル）でした。

あまりのコートの速さに最初は全然ついていけなかったけど、後半は慣れてきていい感じでした。

課題であったリターンをメインに練習しました。

セカンドサーブだけ打つことにして、どんどん前に出てプレッシャーをかけることを決め事に

してやりました

そのせいか試合ではブレーク合戦に

なってしまいました。まっ、練習の成果が出たのかもしれません。

サーブの方も鍛えないといけないな。やはりセカンドサーブでもしっかりまずはバックに入れれるように

ならないと。

夜は、一緒にテニスの練習している後輩と奥さんの会社の同期を呼んでの「鍋パーティ」でした。

今日（月曜日）は、夜ラボに行きました。

金曜から実施していたサブクローニングがうまくいってそうだった。

青白選択の結果を見る限り・・。ただこれまで青白選択には裏切られているので、

ミニプレの結果を見てから喜ぶことにしようっと。明日わかるので楽しみです。

別の実験の結果がどうも予測どおりでなかったので、原因を検討しなければいけない。

使っている細胞株の状態がおかしいのか、他に原因があるのか。うーん。

明日は別の構築作製するので、酵素カットして帰宅しました。

来週は久しぶり（といっても3ヶ月振り。いつもは2ヶ月に1回ペース）にセミナーで発表があるので、

データをまとめねば。

4月までバタバタしそうな予感。

ちなみに今年の仕事初めの日は、入社して初めて会長、社長が研究所の方に来られ、

直接今年度の抱負を述べられた。それだけ今年度に気合が入っているということなのでしょうか？

確かにウチは製薬といっても大きくないので、現在進行形のパイプラインをなんとか前に進める必要が

あって、今年度はそういう意味では大事な1年ではある。

僕が関与しているプロジェクトも今年度が山場になりそうです。

臨床試験を始めれるかどうかが、今年度末には結論が出そうなので・・。

楽しみでもあり、不安でもありますが。すでにアメリカでは同じものが臨床試験しているので

問題ないと思うのですが、日本では日本の手順をしっかり踏まないといけないので大変です。

人に命に関わることなので当然なんですが・・。

とりあえず僕のメインは、

①製造に関する諸検討

②新規機器のバリデーション及び既存機器の再バリデーション

③製造工程のプロセスバリデーション

なので、滞りなく進めようと思っています。ま、なんとかなるでしょう！！

で、昨日は夜遅かったので更新ができなかったのですが、

仕事が終わった後、ラボに行きました。

ラボの方も今週水曜日が実質実験初めなので、まだ全体的に実験がノッてきていない感じで、

帰省されている人も多いので、来週ぐらいから本格的に動きだすと思います。

M2の人は今月末には、修論発表の原稿を作成しないといけないらしいからバタバタしだすでしょう。

昨日は水曜日に細胞の元気付けをしておいたので、それのプレートへのストリークと

制限酵素処理しておいたプラスミドとPCRの電気泳動、

あと、ある細胞株の表現型を相補するマルチコピーサプレッサーを含むプラスミドの

スクリーニングを進めているのだが、これの挿入遺伝子の断片のクローニングを行った。

といっても時間がなかったので、ライゲーションをo/nにして帰りました。

明日、一緒に実験を進めているM2の学生さんにtransformしてもらう予定です。

PCRに使用するサーマルサイクラーの調子が悪いせいか、目的のサイズの遺伝子が増幅されなかった。

ポジコンもあまり増えが悪かった、というか増えてなかったので、

サーマルサイクラーか、何か入れ忘れたのが原因だろうと思うが、おそらくサーマルサイクラーだろう。

4台あるうちのどれもいまいち調子が悪いので、なんとかして欲しい。

温度コントロールがいまいちのような気がする・・。

昨日いったら1台、入院になってたし・・。新しいの買わないかな？

今日は朝から子供の体操教室、午後からは遊び相手とバタバタ。

平日は奥さんに任せっきりなんで、週末ぐらいは相手してあげないとね。

夕方は、時間もらって3ヶ月ぶりに髪を切りに行きました。あーっ、すっきり。

明日は朝テニスの練習に行く予定。ストレス発散しとかないとね。

きっかけがなく、のびのびになってしまって・・

昨年4月（実際には入学する前の2004年9月頃から通っている・・）から

大学院に入学し、博士号取得を目指しているのだが、

その過程での出来事、自分自身の心境等を記録することを第一目的で開始しようと思う。

日中は会社（製薬会社）に所属しており、基本はそちらなので

そちらでの出来事についても記録しようと思う。

現在某プロジェクトの開発に従事している。

休日は気分転換にテニスをしているので、そちらの練習＆試合の記録もしていこうと思う。

おっと、忘れていたが1歳9ヶ月になる愛娘の成長についても記録しなきゃ。

「継続は力なり」をモットーに学位が取得できるまでの期間を目標に続けていこうと思う。

よろしくお願いします。